ILMU PERTANIAN UNJA: LAPORAN PRAKTIKUM MINGGUAN KULTUR JARINGAN TANAMAN

BAB I

PENDAHULUAN

Judul : PERSIAPAN LARUTAN STOK DAN PEMBUATAN MEDIUM VW

1.1 Tujuan

Tujuan dari praktikum kali ini yaitu melatih keterampilan mahasiswa dalam mempersiapkan larutan stok medium dan zat pengatur tumbuh.

1.2 Prinsip Teori

Kultur jaringan (Tissue culture) adalah membudidayakan suatu jaringan tanaman menjadi tanaman kecil yang mempunyai sifat sama dengan induknya. Juga Merupakan metode untuk mengisolasi bagian tanaman seperti protoplas, sel, jaringan dan organ (daun,batang, akar, biji,bunga,buah) dan menumbuhkan dalam kondisi aseptik (Rahardja 1989). Menurut Nugroho dan Sugito (2004) Bagian tanaman yang akan dikulturkan disebut eksplan. Jadi eksplan bisa berupa mata tunas, anthera, batang, daun dan akar yang masih muda dan terdiri dari sel-sel meristematis, yang mana sel-selnya masih aktif membelah-belah dan apabila dikulturkan pada media tumbuh yang sesuai secara in vitro, maka eksplan tersebut akan tumbuh dan berkembang biak menjadi banyak.

Media merupakan faktor penentu dalam perbanyakan dengan kultur jaringan. Komposisi media yang digunakan tergantung dengan jenis tanaman yang akan diperbanyak. Media kultur yang baik seharusnya menyediakan unsur hara baik makro maupun mikro, sumber vitamin dan asam amino, sumber karbohidrat, zat pengatur tumbuh, senyawa organik sebagai tambahan seperti air kelapa, ekstrak buah dll, bahan pemadat: agar-agar dan gelrite dan juga menyediakan arang aktif untuk kasus tertentu untuk tanaman.

Salah satu kendala yang dihadapi dalam kultur jaringan tanaman adalah bahwa kebutuhan nutrisi untuk pertumbuhan yang optimum sangat berbeda antar spesies sehingga tidak ada satu medium pun yang dapat di anjurkan untuk digunakan secara universal (Taji et al,. 1997). Oleh karenanya tidaklah mengherankan bila dewasa ini terdapat ratusan komposisi medium yang telah dikembangkan untuk berbagai spesies atau kultivar tanaman.

Tanaman yang tumbuh pada kondisi normal merupakan individu ototrop sejati dan mampu mensintesis seluruh kebutuhan organiknya. Walaupun tanaman yang ditumbuhkan secara in vitro sebenarnya mampu mensintesis senyawa – senyawa ini, namun tanaman tersebut memproduksinya dalam jumlah yang tidak mencukupi, sehingga satu atau beberapa macam senyawa, misalnya vitamin harus ditambahkan kedalam medium.

Selain senyawa – senyawa organik, senyawa – senyawa kompleks juga sering digunakan didalam medium kultur jaringan tanaman, termasuk ekstrak ragi, hidrilesat kasein, air kelapa, jus jeruk, daging buah nenas, dan banyak lagi yang lainnya. Penambah satu atau lebih senyawa – senyawa kompleks ini menghasilkan medium yang disebut undefined medium (Doods dan Roberts, 1985). Dengan penelitian yang memadai, mungkin saja dapat menggantikan senyawa – senyawa kompleks dengan suatu senyawa tunggal, barangkali sebagai vitamin atau asam amino tambahan.

Untuk lebih memahami komposisi nutrisi yang diberikan didalam medium kultur, topic pertama pada praktikum yang akan dilaksanakan ini adalah pembuatan larutan stok medium dan pembuatan medium. Stok medium yang akan dibuat pada praktikum ini adalah komposisi VW (Vacin danWent) dan zat pengatur tumbuh IAA dan BAP. Komposisi medium VW selengkapnya disajikan pada Tabel 3. 1

Tabel 3.1 Komposisi Medium Vacin dan Went (VW) (1994) pada pH 5,6 – 5,8

No	Senyawa	Per liter stok	Pemakaian
No	Senyawa	Per liter stok	Stok	Per liter medium
A	(NH₄)NO₂	25,000 g	20,00 ml	500,00 mg
B	KNO₃	26,250 g	20,00 ml	525,00 mg
C	KH₂PO₄	50,000 g	5,00 ml	250,00 mg
D	MgSO₄. 7H₂O MnSO₄.4H₂O	50,000 g 1,560 g	5,00 ml	250,00 mg 7,00 mg
E	(Ca2)₃PO₄	50,000 g	5,00 ml	250,00 mg
F	Fe3-Tartat	2,800 g	5,00 ml	28,00 mg
Sukrosa				20,000,000 mg
Agar				7,000,000 mg

BAB II

METODE PRAKTIKUM

2.1 Waktu dan Tempat

Praktikum Kultur Jaringan Tanaman ini dilaksanakan pada hari Selasa tanggal 29 Oktober 2012 pada pukul 10.00 WIB sd selesai di Laboratorium Kultur Jaringan Tanaman Fakultas Pertanian Universitas Jambi.

2.2 Alat dan Bahan

Alat yang digunakan yaitu botol kultur, pH meter, Erlenmeyer, gelas ukur, karet gelang, tissue, hot plate, timbangan analitik, plastic dan kertas label.

Bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu (NH₄)NO₂, KNO₃, KH₂PO₄, MgSO₄, H₂O, MnSO₄, (Ca2)₃PO₄ dan Fe3-Tartat.

2.3 Cara Kerja

1. Siapkan bahan- bahan yang seperti KNO₃, KH₂PO₄, MgSO₄, H₂O, dan MnSO₄.

2. Timbang masing – masing bahan tersebut dengan menggunakan timbangan biasa.

3. Panaskan bahan – bahan tersebut menggunakan hot plate.

4. Setelah pH 5,6 – 5,8 turunkan.

5. Masukkan stok tersebut kedalam botol yang telah disiapkan.

6. Dinginkan dalam kulkas.

BAB III

HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1 Hasil

3.1 Pembahasan :

Media merupakan suatu bahan yang penting untuk pertumbuhan kultur. Media untuk pertumbuhan kultur dapat berupa media padat dan media cair. Media padat biasanya digunakan untuk mengkulturkan kalus kemudian diinduksi menjadi tanaman lengkap, sedangkan media cair biasanya digunakan untuk kultur sel. Komponen yang penting dalam suatu media adalah senyawa anorganik, sumber karbon, vitamin, zat pengatur tumbuh, dan suplemen organik (Yuwono 2008).

Media Knudson dan media Vacin and Went, media ini dikembangkan khusus untuk kultur anggrek. Tanaman yang ditanam di kebun dapat tumbuh dengan baik dengan pemupukan yang hanya mengandung N dari Nitrat. Knudson pada tahun 1922, menemukan penambahan 7.6 mM NH₄⁺ disamping 8.5 mM NO3^-, sangat baik untuk perkencambahan dan pertumbuhan biji anggrek. Penambahan NH₄⁺ ternyata dibutuhkan untuk perkembangan protocorm. Media yang VW ( Vacin and Went) dapat juga digunakan dalam penumbuhan eksplan anthorium, jagung, dan bawang merah

BAB 1V

KESIMPULAN

4.1 Kesimpulan

Dari hasil praktikum yang dilaksanakan dapat disimpulkan :

1. Media kultur jaringan merupakan faktor penting penentu keberhasilan perbanyakan tanaman secara kultur jaringan. Media tanam harus berisi semua zat yang diperlukan untuk menjamin kebutuhan eksplan.

2. Media vacin dan went ini dikembangkan khusus untuk kultur anggrek.

DAFTAR PUSTAKA

Zulkarnain, H.2009. Kultur Jaringan Tanaman. Jakarta. PT Bumi Angkasa.

Zulkarnain, H. 2005. Penuntun Praktikum Kultur Jaringan Tanaman. Jambi. Universitas Jambi.

Rahardja, P.C. dan Wahyu Wiryanto. 2004. Aneka Cara Memperbanyak Tanaman. Jakarta: Agromedia Pustaka.

Marlina N. 2004. Teknik Modifikasi Media Murashige dan Skoog (MS) untuk Konservasi In Vitro Mawar (Rossa spp.). Buletin Teknik Pertanian. 9(1):4-6.

Nugroho A dan Sugito H. 2004. Teknik Kultur Jaringan. Penebar Swadaya: Jakarta

Rahardja PC. 1989. Kultur Jaringan: Teknik Perbanyakan Tanaman secara Modern. Penebar Swadaya: Jakarta.

Trigiano, RN and Gray DJ. 2000. Plant Tissue Culture Concepts and Laboratory Exercises. Boca Raton: CRC Press.

Yuwono T. 2008. Bioteknologi Pertanian. Yogyakarta: Universitas Gajah Mada Press.

Wetter LR and Constabel F. 1991. Metode Kultur Jaringan Tanaman. Diterjemahkan oleh Widianto MB. Bandung: ITB Press.

Indah Pratiwi,dkk. 2009. Penggunaan Jenis Media Dasar Dan Kinetin Untuk Induksi Organogenesis Anthurium Gelombang Cinta (Anthurium plowmanii) Secara In Vitro. Bogor: Departemen Agronomi dan Hortikultura, Fakultas Pertanian, IPB

Leo, Anjar Kusuma. 2010. Kultur Jaringan Tanaman Jarak Pagar.

Pierik, R.L.M. 1987. In vitro culture of higher plants. Martinus Nijhoof of Publishers. Neteherland.